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何为G+菌和G-菌

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第二章

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发表于 2012-6-7 19:28:51 | 显示全部楼层 |阅读模式

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阐明G+菌和G-菌的意义

为什么要来谈G+菌和G-菌，因为在后面的介绍抗菌药我们会用到，不同的细菌感染所用的抗菌药不同。例如如，青霉素G（天然青霉素），就主要针对G+菌感染，只对G-菌部分敏感，这主要和细菌细胞壁的结构有关。
   抗菌药主要是一些抗生素，抗生素滥用在中国的情况很严重，其导致的问题可能是最后细菌感染将无药可治，比如现在出现的一个名词叫“超级细菌”，其产生原因是因为人们滥用抗生素，导致某些细菌对大部分抗生素都产生耐药性，最后这些细菌感染带来的结果相当可怕。所以现在国家开始规范抗生素使用，能不用抗生素尽量少用或者不用，对不同的病症患者使用合适的抗生素，做到不滥用，不多用。由此我们区分不同的细菌感染将显得非常重要。
   G+菌和G-菌的是通过革兰氏染色法来划分的，G+菌和G-菌细菌的细胞壁的组分和结构不同（参见我的前篇文章：细菌的细胞壁），所以染色结果不同，这样我们就把其鉴别开来了。
革兰氏染色法       我们来看看什么是革兰氏染色法。
      革兰氏染色法是细菌学中广泛使用的一种鉴别染色法，1884年由丹麦医师、细菌学家Christain Gram创立。其一般分为四个步骤：初染，媒染，脱色，复染。
染色液
   结晶紫溶液  结晶紫乙醇饱和溶液（取结晶紫约 4~8g，溶于 95%乙醇 100ml中）20ml，1%草酸铵溶80ml
   将上述两溶液混合，过滤。结晶紫不可用龙胆紫代替。前者是纯品，后者不是单一成分，易出假阳性。结晶紫溶液放置过久会产生沉淀，不能再用。
助染剂
      碘 1g 碘化钾 2g 蒸馏水 300ml
   将碘与碘化钾先行混合，加入少许蒸馏水，充分振荡。待完全溶解后再加入其余的蒸馏水。当溶液由棕黄色变为淡黄色时应弃去。为易于储备，可将上列碘与碘化钾溶于30ml蒸馏水中，用前稀释。
脱色剂
   95%乙醇。
复染剂
   沙黄 0.25g  95%乙醇 10ml  蒸馏水 90ml
   将沙黄溶于乙醇中，待完全溶解后加入蒸馏水。
染色步骤
   1、将培养18~24h的培养物涂片，要涂得薄些。将涂片在火焰上加温固定，待冷却后滴加结晶紫溶液，1min后水洗。
   2、滴加助染剂，1min后水洗。
   3、滴加脱色剂，摇动玻片，直至无紫色脱落为止（约 20~30s）水洗。
   4 、滴加复染剂，1min后水洗，晾干，镜检。呈紫色者为革兰氏阳性菌，红色者为阴性菌。
染色结果
   有芽胞的杆菌和绝大多数和球菌，以及所有的放线菌和真菌都呈革兰氏正反应；弧菌，螺旋体和大多数致病性的无芽胞杆菌都呈现负反应。

革兰氏染色法的原理
   目前革兰氏染色法的原理在学术上有三种学说：等电点学说，化学学说以及渗透学说。
   在这里我们只讲解最普遍接受的，从细胞壁结构和组成来看：
   G+菌的细胞壁主要成分为肽聚糖，其层数多，具有致密的特点，初染时，染料由缝隙进入细胞质中，使细菌变为紫色，当用酒精脱色时，肽聚糖收缩，染料不能被洗脱，所以不能成功复染，最后染色结果为G+菌显紫色。
   G-菌细胞壁肽聚糖薄且少，与G+菌相比，其脂质成分非常多，初染媒染时区别不大，当用酒精脱色时，肽聚糖几乎起不到阻碍的作用，而脂质部分溶于乙醇中，导致染料流出，使其能成功复染，最后显复染剂的颜色红色。
   到这里，大家应该都明白到底什么是G+菌，什么是G-菌了吧，大多数革兰氏阳性菌对青霉素、头孢霉素等作用于细菌细胞壁的抗生素敏感，而多数革兰氏阴性菌对作用于细胞内核糖体的红霉素、链霉素等抗生素敏感，这对我们使用抗菌药很有参考价值。