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第一章
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本帖最后由 nikki 于 2013-4-14 10:41 编辑
申明：我不确定所有括号里的中文是对的… 如果有错的，请参考英文….
介绍：
HPLC, High Performance Liquid Chromatography, 高效液相色谱法。从名字就知道这个使用来分离液体的。
HPLC分析样品速度快，有高灵敏度。因为不同的 compounds 在column 里面移动的时间不一样，所以通过在 column 里面移动的时间可以判定有什么不同的 compound 在被测的液体里。好比说在无糖可乐里面含有 人工糖，咖啡因， 醋酰水杨酸，这些 compounds 是可以被分离出来，并得到一张这样的图。
图 1.
这张是无糖百事可乐的图。纵轴是 Area （没查到翻译…）, 横轴是mg/mL(浓度？)。 三个不同的 peaks（顶点）代表了三个不一样的 conpounds。1.306min 的是 咖啡因; 2.457min 的是 Aspirin (醋酰水杨酸); 4.825min 的是人工糖。 因为不同的compound 在 column 里面移动的时间不一样，所以才有了这些 peaks
但是，样品准备个麻烦呐….. 4小时的实验有2.5小时在准备15个样品…. 。
图 2. Cloumn：
main column 有两个部分组成，mobile phase 和 stationary phase。stationary phase 的主要成分是 Microporous Silica （微孔二氧化硅... 好奇怪...），pH ＝ 8。
关于实验：
1. 固体样品要研磨，溶解，稀释，装瓶（应该是叫这个吧）…
2. 在这个HPLC实验中，常用容器是Volumetric Flask（刻度烧瓶）；micropipet (微量吸移管)会用到，因为样品容器只能容纳是1.5mL，那个0.5mL 需要用微量吸移管取得 （那小瓶子好萌啊～）。
图 3：专用瓶子
[fold]http://sunny123aijiren.en.ec21.com/offer_detail/Sell_1.5ml_hplc_vial_for--11090397.html?gubun=S[/fold]
3. 所有溶液需要过滤。
减少误差：
1. 最好用装了溶剂dropper (点滴器)将固体粉末冲近容器里。这样以来可以减少固体粉末遗失，因为部分粉末会粘在 mortar（研钵）上。
图 4：研钵
[fold]http://en.wikipedia.org/wiki/File:White-Mortar-and-Pestle.jpg[/fold]
2. 在sonicate（声波降解标本）之后，需要重新将溶剂添加至刻度烧瓶的刻度上，因为HPLA的溶剂多为易挥发液体。
暂时就是这样了，如果有问题，我很乐意回答。感觉我好像神马都没讲到... |
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发表于 2013-4-14 10:41:55
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